Isabel de Portugal (Lisboa, 24 de octubre de 1503) fue hija del rey Manuel I de Portugal y de María de Aragón

Educada con gran esmero, llegó a dominar el latín y otras lenguas. A la edad de 22 años de edad se casó con su primo hermano, Carlos I de España, y V de Alemania, hijo de Juana de Castilla y Felipe el Hermoso, duque de Borgoña. Esta boda se celebró en los Reales Alcázares de Sevilla. De sus cinco hijos, el mayor, Felipe II, llegó a ser rey de España.

Carlos I de España fue el hombre más poderoso de su tiempo y debido a sus constantes viajes por Europa, Isabel de Portugal fungió como gobernadora de los reinos españoles.

De las posesiones en el Nuevo Mundo (América) firmó diferentes documentos, como la Real Cédula de 1532, en la que se otorgó el título de Ciudad de los Ángeles a la llamada Puebla, condonando el pago de impuestos por 30 años.

A nombre de Carlos I y en carácter de regenta firmó el 20 de julio de 1538 la Real Provisión que le concedió el Escudo de Armas a la misma Ciudad, esto a solicitud de don Gonzalo Díaz de Vargas.

Isabel de Portugal murió en Toledo el 1 de mayo de 1539, tras lo cual el rey Carlos I se retiró al Monasterio de Santa María de la Sisla y le encargó a su hijo, Felipe II, la organización de la comitiva que trasladó el cadáver desde Toledo a Granada, para ser enterrada en la Capilla Real.